Abstract:
El ciruelo europeo (Prunus domestica L.) es una de las especies más relevantes a nivel económico dentro de los
frutales de Carozo, siendo la variedad ‘D´Agen’ la más cultivada en nuestro país. El mejoramiento clásico de los
frutales de carozo se realiza mediante cruzamientos entre parentales seleccionados y la evaluación y selección de la
progenie resultante. Si bien este enfoque ha permitido obtener variedades elite en casi todas las especies del género
Prunus, presenta limitaciones entre las cuales se encuentran los extensos ciclos reproductivos y largos periodos
juveniles, siendo de entre 5-6 años en ciruelo. A esto se suma el tiempo necesario para la expresión completa del
potencial genético y la evaluación de caracteres en distintos ambientes, totalizando unos 12-15 años para obtener
una nueva variedad. El desarrollo de herramientas biotecnológicas, como la transformación genética, podría permitir
la obtención de variedades mejoradas de forma discreta en un plazo relativamente corto. Sin embargo, a pesar de
los esfuerzos por establecer protocolos eficientes de mejoramiento genético aplicables, en ciruelo europeo solo se
han transformados unas pocas variedades y en la mayoría de los casos las eficiencias de transformación son bajas.
El objetivo general de este trabajo fue desarrollar herramientas biotecnológicas para la mejora de ciruelo europeo.
Para lo cual se construyó el vector pMDC32-ptFT1 el cual permitirá, en un futuro, su utilización para la
transformación genética de frutales como ciruelo y duraznero, con el fin de acortar sus ciclos reproductivos mediante
la expresión del gen ptFT1. Se definió también 5 mg/l como la concentración de Higromicina a utilizar en la
selección de transformantes en futuros ensayos de transformación de cotiledones ‘D´Agen’ Se logró la
transformación de diferentes cepas de A. tumefaciens con el vector pCAMBIA2301, sentando bases para futuros
ensayos que permitan determinar y comparar su capacidad de transformación mediante la expresión de GUS en
distintos tejidos. También se estableció la sensibilidad de las cepas a los antibióticos Cefotaxima y Timetina, siendo
100 mg/l y 75 mg/l respectivamente, las concentraciones que inhiben el crecimiento de las mismas. Se logró la
transformación transiente de hojas y cotiledones de 'D'Agen'. En cotiledones se estudió el efecto del estado
fisiológico de la bacteria, la sonicación y la aplicación de vacío, sobre la expresión transiente del gen GUS. Y si
bien no se obtuvo un modelo estadísticamente significativo, se identificaron factores que afectan la expresión
transiente de GUS. Este trabajo representa el primer reporte sobre la transformación transiente de hojas y cotiledones
de la variedad ‘D´Agen’.
