Caracterización morfológica y molecular de las pulgas del género Neotyphloceras (Siphonaptera: Ctenophthalmidae) de Argentina

Abstract

El género de pulgas Neotyphloceras (Insecta: Siphonaptera: Ctenophthalmidae) incluye 7 especies y subespecies parásitas de roedores. Su distribución geográfica abarca desde Venezuela hasta el sur de Chile y Argentina e incluye un extenso rango de hábitats que varían en diversidad. En la Patagonia argentina, las especies de este género son las más abundantes y prevalentes en los ensambles de pulgas asociados a roedores. Históricamente, la identificación de las especies y subespecies de Neotyphloceras se basó en la caracterización de la compleja morfología de los segmentos abdominales modificados y genitalia, principalmente de los machos, ya que en las hembras de varias especies no se han descrito diferencias diagnósticas significativas. Recientes estudios moleculares han demostrado ser una herramienta complementaria eficaz para esclarecer la taxonomía de especies de pulgas de la familia Ctenophthalmidae. En este contexto, el objetivo de este trabajo fue ampliar el conocimiento sobre el género Neotyphloceras mediante la caracterización morfológica y molecular empleando el marcador mitocondrial Citocromo Oxidasa I (COI) de especímenes asociados a poblaciones de roedores sigmodontinos de la Patagonia argentina. Se analizaron 58 ejemplares machos y hembras de Neotyphloceras spp. El estudio morfológico realizado, examinando las características diagnósticas que recopilan la información existente para las descripciones y redescripciones de todas las especies y subespecies del género, permitió la identificación a nivel específico de 29 ejemplares de Neotyphloceras crackensis y 11 de Neotyphloceras pardinasii. Para el estudio molecular, se extrajo ADN genómico de 45 muestras de Neotyphloceras spp. para la posterior amplificación y secuenciación de un fragmento de 453 pb de COI. La secuenciación fue exitosa en 12 muestras, las cuales se agruparon en 10 haplotipos, con 35 sitios polimórficos e índices de diversidad haplotípica y nucleotídica de 0,970 y 0,032, respectivamente, lo cual indicaría que existe mucha variación entre los haplotipos. Al incorporar al análisis la única secuencia del género Neotyphloceras reportada hasta el momento, Neotyphloceras crassispina ssp., las 13 secuencias fueron agrupadas en 11 haplotipos. Esta secuencia presentó 217 sitios variables en comparación a las secuencias de este estudio. Los índices de diversidad haplotípica y nucleotídica también fueron superiores a los hallados en el set de datos anterior (0,974 y 0,1168, respectivamente). Las relaciones haplotípicas y los árboles filogenéticos agruparon a las muestras en 2 grandes clados o grupos, encontrándose las secuencias de este estudio en un grupo mientras que en el otro se encuentra la secuencia de Neotyphloceras reportada. Asimismo, agrupa de manera incorrecta las secuencias de ejemplares que comparten una determinada familia, género o especie. Esto nos estaría indicando una mala resolución sistemática del fragmento estudiado con el marcador molecular COI para este grupo de taxones. Este trabajo de tesis es un gran aporte al conocimiento molecular del género Neotyphloceras, debido a que solo existe una única secuencia reportada para el mismo, disponible en Genbank. Al mismo tiempo, sugiere la incorporación al estudio morfológico, de otros marcadores mitocondriales y/o nucleares, más informativos, que permitan corroborar la variación entre haplotipos y discriminar de manera más eficiente las especies de pulgas. Este estudio es el primero en Argentina que involucra tantos aspectos morfológicos como genéticos en los sifonápteros. Considerando que Argentina presenta la mayor diversidad de pulgas de Sudamérica, esta tesis sienta las bases para futuras investigaciones que permitirán generar un gran caudal de información de referencia para la región.