Neuropéptidos en el ovario de Rhodnius prolixus: Análisis transcriptómico y funcional

Abstract

Los neuropéptidos son fundamentales en la coordinación de todos los procesos fisiológicos que suceden en un insecto. Sucesos tan diversos como, muda, osmorregulación, desarrollo embrionario y post embrionario, metabolismo y reproducción son sincronizados por estas moléculas mensajeras. El insecto hematófago Rhodnius prolixus es capaz de transmitir el protozoario Tripanosoma cruzi, agente etiológico de la enfermedad de Chagas. Debido a la ausencia de vacunas y tratamientos efectivos contra la enfermedad, el medio elegido para reducir la transmisión de la enfermedad es a través del control vectorial. Dentro de este marco, se ha implementado el uso de insecticidas. El diseño de este tipo de sustancias hace que actúen indiscriminadamente sobre todas las especies de insectos, conduciendo a la disminución indeseada en el número de poblaciones de otros insectos inocuos o benéficos, al surgimiento de resistencia en los vectores y provocando impactos negativos en la salud humana. Esta situación expone la necesidad de diseñar métodos de control alternativos. Sumado a su relevancia sanitaria, R. prolixus es considerado organismo modelo para el estudio de procesos fisiológicos y genéticos. Debido a la centralidad de los neuropéptidos en la regulación de procesos fisiológicos, el sistema endocrino se presenta como una fuente de potenciales blancos para el diseño de nuevos insecticidas. Por lo tanto, en este trabajo se propuso identificar neuropéptidos con expresión activa en un transcriptoma de ovario de R. prolixus, ensamblado mediante dos enfoques: guiado por la referencia y de novo. Como resultado, se infirió un total de 18 neuropéptidos, siete identificados en el guiado por la referencia y 11 en el ensamble de novo. De los previamente identificados, se decidió validar experimentalmente uno de ellos, la hormona adipocinética (AKH). Se determinó la modulación de su expresión durante la ovogénesis y el desarrollo embrionario temprano, evidenciando una marcada expresión durante en el ovario vitelogénico del triatomino. Por otro lado, se analizó su función en la ovogénesis mediante su silenciamiento génico, mediado por ARN de interferencia (ARNi). Como resultado se observó que el silenciamiento de AKH no afecta la oviposición ni en el desarrollo embrionario de R. prolixus, pero sí que cumple un rol durante el proceso de vitelogénesis, ya que afecta la expresión de vitelogenina (Vg) ovárica, proteína principal que presenta el vitelo de los ovocitos en desarrollo.