http://repositorio.unnoba.edu.ar/xmlui/handle/23601/81 Thu, 28 May 2026 23:09:49 GMT 2026-05-28T23:09:49Z http://repositorio:8080/xmlui/bitstream/id/d1d77955-5f6d-41a4-9d98-41edef5608b0/ http://repositorio.unnoba.edu.ar/xmlui/handle/23601/81 http://repositorio.unnoba.edu.ar/xmlui/handle/23601/1018 Infección por Clostridioides difficile: diagnóstico molecular y rol de la IL-17 en cultivos in vitro de órganos Clostridioides difficile (C. difficile), una bacteria anaeróbica gram positiva y formadora de esporas es reconocida como uno de los patógenos más importantes en los centros de salud. La capacidad de formar esporas induce mayores desafíos para reducir su transmisión debido a su resistencia. En los últimos años ha incrementado la incidencia global de la infección por C. difficile, así como la morbilidad y la mortalidad, y ha disminuido el éxito de los tratamientos1,2. Tanto la disrupción de la mucosa intestinal por las toxinas, el principal factor de virulencia de C. difficile, como la alteración de la flora intestinal por los antibióticos son centrales en la patogénesis de la infección por C. difficile (CDI). La CDI, es actualmente la principal causa de infección nosocomial en Estados Unidos, superando a Staphylococcus aureus resistente a la meticilina (MRSA)3 . La principal forma de transmisión es la fecal-oral mediante el contacto persona-persona al traslado de C. difficile en las manos de los trabajadores de la salud4 . Sin embargo, la transmisión en individuos sanos colonizados asintomáticamente ha sido reportada, evidenciando así que los individuos asintomáticos constituyen un importante reservorio de la enfermedad1 . Además, es importante destacar que, aunque se considera una enfermedad nosocomial, los casos de CDI también han comenzado a surgir en la comunidad y en individuos que no presentan los factores de riesgo típicamente asociados a la CDI. Por otro lado, se ha observado un aumento significativo de la enfermedad en animales, señalando el potencial zoonótico, y la presencia de C. difficile en productos derivados y ambientes 5,6 . A diferencia de América del Norte y Europa, poco se conoce sobre la epidemiología en América Latina. Solo se dispone de escasos datos sobre la incidencia y la prevalencia de C. difficile como causa de diarrea en la Argentina7,8,9. Interesantemente, algunos trabajos demuestran que, al menos, el 15% de los casos de CDI fueron detectados en pacientes ambulatorios que presentaban diarrea, destacando el problema de la adquisición comunitaria de C. difficile9,10 . El diagnóstico de la CDI se realiza por la combinación de síntomas clínicos y un test positivo para las toxinas de C. difficile en materia fecal o hallazgos histológicos o endoscópicos de colitis pseudomembranosa. Existe una gran diversidad de test disponibles, incluyendo PCR para los genes de las toxinas A y B, enzimoinmunoensayo (EIA) para la glutamato deshidrogenasa (GDH) de C. difficile y las toxinas A y B, cultivo toxigénico y ensayo de citotoxicidad celular. Actualmente, el test más utilizado en 9 Argentina es el EIA. Si bien este es un método sencillo y de alta especificidad posee una baja sensibilidad. La manera más sencilla para diagnosticar la CDI sería mediante un único test rápido capaz de predecir el estatus de la enfermedad. Sin embargo, como ha sido reportado por Crobach y colaboradores, se propone la utilización de al menos dos test 11, lo cual reduciría el porcentaje de falsos positivos. Debido a esto, uno de los objetivos de este trabajo fue poner a punto una PCR directa a partir de materia fecal, sin necesidad previa de extracción y purificación de ADN. La evaluación de parámetros de calidad de la PCR directa arrojó una alta sensibilidad y especificidad, así como valores confiables de PPV (valor predictivo positivo) y NPV (valor predictivo negativo). Por otro lado, combinando el EIA, el cultivo toxigénico y la PCR directa, realizamos un análisis retrospectivo y prospectivo de muestras de materia fecal obtenidas de centros de salud de la región sanitaria III. De las 97 muestras analizadas, 27 fueron positivas mientras que 66 fueron negativas para la CDI, lo que indica un porcentaje del 27.83% de CDI intra-hospitalaria. La implementación de la PCR directa de materia fecal en los centros de salud, permitiría no solo un diagnóstico más acelerado, barato y preciso, sino que adicionalmente ayudaría al conocimiento de la epidemiologia de la CDI en nuestro país. Además, se analizaron características sociodemográficas, parámetros clínicos y factores de riesgo asociados a la CDI, como el consumo de antibióticos, inhibidores de la bomba de protones y la presencia de comorbilidades. Únicamente se observaron diferencias significativas en el número de leucocitos y linfocitos entre los pacientes CDI+ y CDIsiendo mayores en pacientes colonizados con C. difficile. A pesar de la caracterización temprana de C. difficile en 1935, esta bacteria ha emergido como un asunto sanitario urgente en los últimos años. La interacción entre C. difficile y el sistema inmune del hospedador, como así también la composición de la microflora intestinal, pueden influir en la gravedad de la infección. La patogénesis de la CDI es mediada principalmente por la producción de toxinas que inducen daño tisular y procesos inflamatorios en el hospedador. Si bien la inmunidad innata se encuentra bien caracterizada en modelos humanos y animales de CDI, las respuestas adaptativas permanecen poco exploradas12 . Teniendo en cuenta estos antecedentes, otro de los objetivos del presente trabajo fue caracterizar la respuesta inmune frente a C. difficile utilizando un modelo de cultivo in vitro de tejido. El cultivo in vitro de órganos ha mostrado ser muy útil para estudios que 10 implican agentes infecciosos13,14. y nos permitiría lograr una mejor comprensión de la función de la IL-17 durante la CDI. Los resultados preliminares, nos indican que, podría existir una modulación en la expresión de IL-17, tras desafiar a los tejidos con distintos estímulos de C. difficile. Al mismo tiempo, hemos observado una tendencia al aumento de la expresión de IL-4 e IL-10 luego del desafío con el mismo estimulo. Adicionalmente, luego de estimular los tejidos con C. difficile teñida con FITC hemos podido observar la bacteria tanto en la región submucosa como en la mucosa del intestino grueso. Posteriormente, hemos podido observar que; cuando los tejidos eran desafiados con C. difficile inactivada por calor había una tendencia al aumento en el número de células CD3+ IL-17+ y lo mismo ocurría con el número de células CD3- IL-17+ . Thu, 22 Dec 2022 00:00:00 GMT http://repositorio.unnoba.edu.ar/xmlui/handle/23601/1018 2022-12-22T00:00:00Z http://repositorio.unnoba.edu.ar/xmlui/handle/23601/993 Efecto acumulativo de distintas variedades de soja y trigo en la secuencia soja-trigo/soja sobre el número de individuos y la materia seca aérea de malezas Entre los principales problemas agronómicos causados por el uso excesivo de herbicidas se destacan la expansión de malezas resistentes y la reducción de la biodiversidad en los agroecosistemas. Una estrategia comúnmente postergada en el marco de la integración de métodos de manejo de malezas es la siembra de cultivares con mayor habilidad competitiva frente a las mismas. Esto implica no solamente la supresión del desarrollo de las malezas durante el ciclo de crecimiento del cultivo, sino también la reducción progresiva de la fecundidad a lo largo de las campañas, lo que derivaría en un menor grado de infestación en los lotes productivos. El objetivo de este trabajo fue determinar en condiciones de campo, sí el empleo de diferentes genotipos antecesores de soja y trigo (en una secuencia de dos campañas) incide diferencialmente en el número de individuos (n°.m-2) y la materia seca aérea (g.m-2) de malezas, y sobre la productividad en grano (g.m-2) del último cultivo de la secuencia. De esta manera, se realizó un experimento en campo durante la campaña 2023/24 en la Estación Experimental Agropecuaria INTA Pergamino (Buenos Aires, Argentina) para evaluar el efecto de distintas combinaciones de variedades antecesoras sobre el número de individuos (n°.m-2) y la materia seca aérea (g.m-2) de malezas en distintos momentos del ciclo del último cultivo de la secuencia. Además, se cuantificó la materia seca aérea (g.m-2) en dos momentos del ciclo y la productividad en grano (g.m-2) del último cultivo, en presencia y ausencia de competencia (a través de la aplicación o no de herbicidas). A partir del análisis de datos se observó que la aplicación de herbicidas fue el factor de tratamiento que mayor influencia generó sobre las variables estudiadas. Mediante un análisis de correlación lineal simple se determinó que tanto el número de individuos (n°.m-2) como la materia seca aérea (g.m-2) de malezas se relacionaron de forma significativa y negativa con la productividad en grano (g.m-2) del último cultivo de la secuencia. Esto demuestra que, bajo las condiciones de este estudio, no se observa en el tiempo menor número de individuos y materia seca aérea de malezas, ni mayor productividad en grano del último cultivo de la secuencia, al utilizar distintas combinaciones de genotipos antecesores. Thu, 05 Mar 2026 00:00:00 GMT http://repositorio.unnoba.edu.ar/xmlui/handle/23601/993 2026-03-05T00:00:00Z http://repositorio.unnoba.edu.ar/xmlui/handle/23601/985 Potencial probiótico y tecnológico de levaduras autóctonas aisladas del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires (NOBA) En la producción de alimentos fermentados artesanales, los microorganismos autóctonos o nativos desempeñan un papel esencial en la fermentación y maduración ya que contribuyen al desarrollo de características sensoriales únicas, al mismo tiempo que colaboran en la competitividad frente a patógenos. Su estudio y caracterización resultan relevantes para la preservación de la biodiversidad microbiana regional y la conservación del patrimonio biológico. Este trabajo consistió en el aislamiento y la caracterización tecnológica y funcional de levaduras autóctonas de la región del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires con el objetivo de evaluar su potencial como fermentos en la producción de quesos y/o como probióticos que otorguen un valor sensorial y funcional agregado. A partir de la evaluación morfológica macro y microscópica, se seleccionaron 17 aislamientos que fueron nombrados como: QL, LE, TR, QVA1, QVA2, QVA3, QVA4, LT2, LT3, LT4, LT5, VVA1, VVA2, VA22, VA24, CL22 y CL24, provenientes de quesos y leches regionales. La caracterización genotípica mediante PCR de la región ITS evidenció variaciones de tamaño en los fragmentos generados, con resultados que sugieren la pertenencia a géneros comúnmente hallados en lácteos. La evaluación de las propiedades tecnológicas reveló que los aislados QVA1 y QVA2 poseen características promisorias para ser empleados fermentos adjuntos en la elaboración de quesos. Ambos mostraron alta robustez frente a condiciones de salinidad y pH, tolerando concentraciones de cloruro de sodio del 2,5 a 10 % de cloruro de sodio a pH 5,5. Además, presentaron actividad proteolítica en agar leche, capacidad de asimilar citrato en agar Simmons y degradar los aminoácidos evaluados, lo que sugiere su potencial para generar compuestos de interés sensorial. A su vez, los aislados TR, CL24 y VA22 mostraron resultados positivos para producción de diacetilo-acetoína mediante la prueba de Voges-Proskauer y actividad lipolítica en agar manteca y en agar Tween 80. La caracterización del potencial probiótico in vitro relevó una elevada supervivencia a las condiciones simuladas de digestión en los aislados VA24 y QL. Ambos mostraron altos niveles de coagregación frente a Staphylococus aureus, mientras que para Escherichia coli y Enterococus faecalis predominaron niveles intermedios. Además, presentaron actividad antimicrobiana positiva frente a E. faecalis según el ensayo de difusión en agar Muller-Hinton. Por su parte, VA24 mostró altos valores de autoagregación e hidrofobicidad. A futuro los aislados que presentaron características promisorias en este trabajo podrían emplearse como fermentos adjuntos en quesos y evaluar su contribución al perfil sensorial y funcional, así como también validar su eficacia probiótica in vivo. Además, la confirmación de su identidad mediante análisis genético permitirá completar su selección y estudio. En la producción de alimentos fermentados artesanales, los microorganismos autóctonos o nativos desempeñan un papel esencial en la fermentación y maduración ya que contribuyen al desarrollo de características sensoriales únicas, al mismo tiempo que colaboran en la competitividad frente a patógenos. Su estudio y caracterización resultan relevantes para la preservación de la biodiversidad microbiana regional y la conservación del patrimonio biológico. Este trabajo consistió en el aislamiento y la caracterización tecnológica y funcional de levaduras autóctonas de la región del Noroeste de la Provincia de Buenos Aires con el objetivo de evaluar su potencial como fermentos en la producción de quesos y/o como probióticos que otorguen un valor sensorial y funcional agregado. A partir de la evaluación morfológica macro y microscópica, se seleccionaron 17 aislamientos que fueron nombrados como: QL, LE, TR, QVA1, QVA2, QVA3, QVA4, LT2, LT3, LT4, LT5, VVA1, VVA2, VA22, VA24, CL22 y CL24, provenientes de quesos y leches regionales. La caracterización genotípica mediante PCR de la región ITS evidenció variaciones de tamaño en los fragmentos generados, con resultados que sugieren la pertenencia a géneros comúnmente hallados en lácteos. La evaluación de las propiedades tecnológicas reveló que los aislados QVA1 y QVA2 poseen características promisorias para ser empleados fermentos adjuntos en la elaboración de quesos. Ambos mostraron alta robustez frente a condiciones de salinidad y pH, tolerando concentraciones de cloruro de sodio del 2,5 a 10 % de cloruro de sodio a pH 5,5. Además, presentaron actividad proteolítica en agar leche, capacidad de asimilar citrato en agar Simmons y degradar los aminoácidos evaluados, lo que sugiere su potencial para generar compuestos de interés sensorial. A su vez, los aislados TR, CL24 y VA22 mostraron resultados positivos para producción de diacetilo-acetoína mediante la prueba de Voges-Proskauer y actividad lipolítica en agar manteca y en agar Tween 80. La caracterización del potencial probiótico in vitro relevó una elevada supervivencia a las condiciones simuladas de digestión en los aislados VA24 y QL. Ambos mostraron altos niveles de coagregación frente a Staphylococus aureus, mientras que para Escherichia coli y Enterococus faecalis predominaron niveles intermedios. Además, presentaron actividad antimicrobiana positiva frente a E. faecalis según el ensayo de difusión en agar Muller-Hinton. Por su parte, VA24 mostró altos valores de autoagregación e hidrofobicidad. A futuro los aislados que presentaron características promisorias en este trabajo podrían emplearse como fermentos adjuntos en quesos y evaluar su contribución al perfil sensorial y funcional, así como también validar su eficacia probiótica in vivo. Además, la confirmación de su identidad mediante análisis genético permitirá completar su selección y estudio. Thu, 18 Dec 2025 00:00:00 GMT http://repositorio.unnoba.edu.ar/xmlui/handle/23601/985 2025-12-18T00:00:00Z http://repositorio.unnoba.edu.ar/xmlui/handle/23601/984 Efecto del glifosato en la concentración de fósforo en el agua de una laguna pampeana El uso masivo del herbicida glifosato en la Región Pampeana, principal zona productiva de Argentina, ha generado preocupación respecto a su destino ambiental y su potencial impacto en ecosistemas acuáticos, particularmente en las lagunas. El glifosato contiene un 14% de fósforo en su molécula, y su degradación en el agua puede liberar este nutriente, potenciando el proceso de eutrofización que ya afecta a estos sistemas. Este trabajo evaluó el impacto de la aplicación de glifosato sobre la concentración de fósforo en el agua de la Laguna de Gómez, un humedal pampeano clave, mediante un ensayo controlado en microcosmos durante 30 días. Se monitoreó la evolución temporal del Fósforo Total (PT) y el Fósforo Reactivo Soluble (PRS) en tres condiciones: Control (C), Baja concentración (L): 200 µg/L de glifosato y Alta concentración (H): 1000 µg/L de glifosato. Además, se midieron algunas variables fisicoquímicas durante el ensayo. Se observó un aumento significativo y transitorio de PRS en H con respecto al control en T14. Este incremento podría atribuirse a la degradación del glifosato por parte de las cianobacterias detectadas en la muestra de agua. La adición de glifosato en la concentración H causó una caída significativa del pH en T0 con respecto al C, lo cual es coherente con la naturaleza ácida del herbicida. Los microcosmos con concentraciones L y H mostraron correlaciones positivas y elevadas entre PRS y conductividad eléctrica (CE), indicando que el fósforo liberado contribuyó a aumentar la CE del agua. Tue, 09 Dec 2025 00:00:00 GMT http://repositorio.unnoba.edu.ar/xmlui/handle/23601/984 2025-12-09T00:00:00Z