Centro de Investigaciones básicas y aplicadas http://repositorio.unnoba.edu.ar/xmlui/handle/23601/90 2026-07-10T04:08:55Z 2026-07-10T04:08:55Z http://repositorio.unnoba.edu.ar/xmlui/handle/23601/1019 2026-06-17T18:21:06Z 2026-05-22T00:00:00Z

Epidemiology of Clostridioides difficile Infection in Argentina and Associated Risk Factors Evaluated Through a Meta-Analysis Introducción: Clostridioides difficile está clasificada entre las 18 principales amenazas de resistencia a los antimicrobianos y es la causa principal de infección entérica nosocomial. Los casos asociados a la comunidad han aumentado notablemente en las últimas décadas, lo que subraya la necesidad crítica de contar con estadísticas precisas y actualizadas que caractericen la epidemiología de la infección por C. difficile (ICD). Métodos: Realizamos un estudio retrospectivo de casos y controles (2019–2023) para evaluar la prevalencia de ICD en 249 muestras de materia fecal de pacientes hospitalizados en la Región Sanitaria III de Buenos Aires, Argentina. La presencia de C. difficile se detectó mediante un algoritmo diagnóstico que combinó EIA, PCR y cultivo toxigénico. Se analizaron los datos clínicos y demográficos de los pacientes para identificar los factores de riesgo asociados a la ICD. También realizamos una revisión sistemática y un metanálisis para contrastar nuestros resultados con 38 estudios seleccionados de diferentes países. Resultados: Uno de cada cinco pacientes presentó C. difficile como el agente etiológico de la diarrea. El ochenta por ciento de los casos ICD+ portaban cepas toxigénicas, y un tercio de ellos estuvo asociado a entornos comunitarios. La edad ≥ 69 años, el uso previo de antibióticos, la hospitalización previa y los episodios previos de ICD surgieron como factores predisponentes para la enfermedad en nuestra cohorte de estudio. En una evaluación exploratoria de los datos clínicos, los pacientes ICD+ mostraron mayores recuentos de leucocitos y plaquetas, una disminución en el recuento de basófilos y una mayor concentración de urea. A nivel global, el metanálisis confirmó que la edad avanzada, el consumo previo de antibióticos, el uso previo de inhibidores de la bomba de protones, la hospitalización previa y la ICD previa constituyen factores de riesgo para la infección. Conclusiones: Estos resultados enfatizan la importancia de mantener una vigilancia epidemiológica continua de la ICD. Nuestros hallazgos confirmaron factores de riesgo descritos previamente, tanto en nuestra cohorte como a nivel global. Se observaron alteraciones exploratorias en los parámetros de laboratorio, aunque su relevancia clínica y especificidad requieren mayor investigación.; Background: Clostridioides difficile is classified within the first 18 threats for antimicrobial resistance and is the leading cause of hospital-acquired enteric infection. Community-associated cases have notably increased in recent decades, highlighting that accurate and up-to-date statistics characterizing the epidemiology of C. difficile infection (CDI) are critical. Methods: We conducted a retrospective (2019–2023) case-control study evaluating the prevalence of CDI in 249 stool samples from hospitalized patients in the sanitary region III of Buenos Aires, Argentina. The presence of C. difficile was detected by combining EIA, PCR, and toxigenic culture via a diagnostic algorithm. Clinical and demographic data from patients were analyzed to identify CDI-associated risk factors. We also conducted a systematic review and a meta-analysis contrasting our results with 38 studies selected from different countries. Results: One in five patients presented C. difficile as the etiological agent of diarrhea. Eighty percent of the CDI+ cases carried toxigenic strains, with a third of cases associated with community environments. Age ≥ 69 years, previous use of antibiotics, previous hospitalization, and previous episodes of CDI emerged as predisposing factors for CDI in our study cohort. In an exploratory evaluation of clinical data, CDI+ patients showed higher leukocytes and platelets counts, a decreased basophil count, and increased urea concentration. At the global level, the meta-analysis reinforced advanced age, previous consumption of antibiotics, previous consumption of proton pump inhibitors, previous hospitalization, and previous CDI as risk factors for CDI. Conclusions: These results emphasize the importance of continued epidemiological surveillance of CDI. Our findings confirm previously described risk factors, both in our cohort and at the global level. Exploratory alterations in laboratory parameters were observed, although their clinical relevance and specificity require further investigation.

2026-05-22T00:00:00Z http://repositorio.unnoba.edu.ar/xmlui/handle/23601/927 2025-10-21T21:17:06Z 2025-02-28T00:00:00Z

Fluorescence Assays for the Study of Mycobacterium tuberculosis Interaction with the Immune Receptor SLAMF1 La evaluación de la interacción directa entre patógenos y receptores inmunitarios suele implicar técnicas sofisticadas o el uso de cepas transgénicas y células modificadas genéticamente. En este trabajo, se describe un método alternativo para detectar la interacción bioquímica entre el sensor microbiano de macrófagos SLAMF1 y Mycobacterium tuberculosis. Se desarrollaron dos enfoques técnicos que emplean citometría de flujo y microscopía de fluorescencia. Se generaron extractos de proteínas celulares totales de macrófagos humanos, que luego se incubaron con células completas de M. tuberculosis (WCMtb) o antígenos de M. tuberculosis (Ag Mtb) durante la noche a 4 °C y finalmente se entrecruzaron mediante un tratamiento con formaldehído/glicina/etilenglicol bis (succinimidil succinato). La interacción de SLAMF1 con WCMtb mediante citometría de flujo se detectó con un anticuerpo anti-SLAMF1 PE. La existencia de interacción mediante microscopía de fluorescencia se determinó mediante la fijación de Ags de Mtb teñidos con rodamina-PE a cubreobjetos recubiertos con poli-D-lisina, que se incubaron con el extracto proteico total de macrófagos derivados de monocitos. Tras el tratamiento de entrecruzamiento, se visualizó SLAMF1 mediante anticuerpos primarios (anti-SLAMF1) y secundarios (Alexa Fluor 488). Los ensayos proporcionaron una sólida herramienta bioquímica para medir las interacciones patógeno-inmunorreceptor, superando las dificultades asociadas con las líneas celulares transgénicas y los experimentos de modulación de la expresión génica de proteínas.; The evaluation of direct interaction between pathogens and immune receptors usually involves sophisticated techniques or implies the use of transgenic strains and genetically engineered cells. Here, an alternative method to detect biochemical interaction between the macrophage microbial sensor SLAMF1 and Mycobacterium tuberculosis is described. Two technical approaches employing flow cytometry and fluorescence microscopy were developed. Total cell protein extracts from human macrophages were generated, then incubated with whole cells of M. tuberculosis (WCMtb) or M. tuberculosis antigens (Mtb Ags) overnight at 4 °C and finally cross-linked using formaldehyde/glycine/ethylene glycol bis (succinimidyl succinate) treatment. SLAMF1 interaction with WCMtb by flow cytometry was detected with a PE-specific anti-SLAMF1 antibody. The existence of interaction by fluorescence microscopy was performed by attaching Rhodamine-PE stained Mtb Ags to poly-D-lysine coated slides, which were incubated with the total protein extract from monocyte-derived macrophages. After cross-linking treatment, SLAMF1 was visualized using primary (anti-SLAMF1) and secondary (Alexa Fluor 488) antibodies. The assays provided a strong biochemical tool to measure pathogen-immunoreceptor interactions, overcoming the difficulties associated with transgenic cell lines and protein gene expression modulation experiments.

2025-02-28T00:00:00Z http://repositorio.unnoba.edu.ar/xmlui/handle/23601/835 2025-10-21T21:16:16Z 2024-01-05T00:00:00Z

Platelets promote human macrophages-mediated macropinocytosis of Clostridioides difficile; Las plaquetas promueven la macropinocitosis de Clostridioides difficile mediada por macrófagos humanos Clostridioides difficile es el principal agente causal de diarreas hospitalarias. La infección por C. difficile (CDI) es una enfermedad potencialmente letal, cuya terapia actual es el uso de antibióticos sin ser totalmente eficaz. Los mecanismos moleculares, las condiciones inflamatorias y las respuestas inmunes del hospedador que podrían beneficiar la persistencia o eliminación de C. difficile permanece poco explorados. Los macrófagos realizan diferentes formas de endocitosis como parte de sus funciones de vigilancia inmune y las plaquetas, clásicamente conocidas por su papel coagulatorio, también son importantes moduladores del sistema inmune. El objetivo de este estudio fue evaluar la endocitosis de C. difficile en su forma vegetativa por macrófagos humanos y la participación de las plaquetas en este proceso. Nuestros resultados mostraron que tanto los macrófagos como las plaquetas interactúan con C. difficile viva y muerta por calor. Además, las plaquetas forman complejos con monocitos humanos en sangre fresca de donantes sanos y la presencia de C. difficile induce estas interacciones célula-célula. Mediante citometría de flujo y microscopía confocal demostramos que los macrófagos pueden internalizar a C. difficile y que las plaquetas promueven esta internalización. Mediante el uso de inhibidores de diferentes vías endocíticas, demostramos que la macropinocitosis es la vía de entrada de C. difficile a la célula. En conjunto, nuestros hallazgos son la primera evidencia de la internalización de C. difficile vegetativa no toxigénica e hipervirulenta por macrófagos humanos y destacan el papel de las plaquetas en la inmunidad innata durante la CDI. Descifrar la interacción de C. difficile con el sistema inmunológico podría proporcionar nuevas herramientas para comprender la patogénesis de C. difficile y para el desarrollo de terapias dirigidas al hospedador. Clostridioides difficile is the main causative agent of hospital-acquired diarrhea and the potentially lethal disease, C. difficile infection. The cornerstone of the current therapy is the use of antibiotics, which is not fully effective. The molecular mechanisms, inflammatory conditions and host-immune responses that could benefit the persistence or elimination of C. difficile remain unclear. Macrophages perform different ways of endocytosis as part of their immune surveillance functions and platelets, classically known for their coagulatory role, are also important modulators of the immune system. The aim of this study was to evaluate the endocytosis of vegetative C. difficile by human macrophages and the involvement of platelets in this process. Our results showed that both macrophages and platelets interact with live and heat-killed C. difficile. Furthermore, platelets form complexes with human monocytes in healthy donor’s fresh blood and the presence of C. difficile increased these cell-cell interactions. Using flow cytometry and confocal microscopy, we show that macrophages can internalize C. difficile and that platelets improve this uptake. By using inhibitors of different endocytic pathways, we demonstrate that macropinocytosis is the route of entry of C. difficile into the cell. Taken together, our findings are the first evidence for the internalization of vegetative non-toxigenic and hypervirulent C. difficile by human macrophages and highlight the role of platelets in innate immunity during C. difficile infection. Deciphering the crosstalk of C. difficile with immune cells could provide new tools for understanding the pathogenesis of C. difficile infection and for the development of host-directed therapies.

2024-01-05T00:00:00Z http://repositorio.unnoba.edu.ar/xmlui/handle/23601/666 2025-10-21T21:15:19Z 2023-04-07T00:00:00Z

A Novel MSH6 Gene Variant in a Lynch Syndrome Patient with Lipomas Colorectal cancer is one of the most frequently occurring cancers today, with a large percentage of cases having a hereditary basis. Lynch syndrome is the most common cause of hereditary colorectal cancer. The genetic defect characteristics of this syndrome involve mutations in mismatch repair (MMR) genes, which result in microsatellite instability. Early detection of the mutation can help evaluate the cancer risk and, consequently, a proper course of clinical management for the person harboring the mutation. Herein, we describe the first report of a c.1458dup (p.Glu487*) new mutation in a 53-year-old colorectal cancer patient with diagnosed Lynch syndrome. Additionally, the existence of lipomas in this patient and his family could be related to this syndrome. Further investigation may provide a possible visual clue that can indicate a need for genetic screening.

2023-04-07T00:00:00Z